DyLigh™系列熒光標(biāo)記是一種近年來被廣泛應(yīng)用的新型熒光染料，由于具有很好的光譜寬度、更強(qiáng)的熒光強(qiáng)度，更高的光學(xué)耐受性(抗淬滅性)、對pH不敏感、分子較小而滲透性更好的優(yōu)勢，越來越受到科研客戶的喜愛。DyLight™種類齊全，如Dylight 405是藍(lán)色熒光，替代Alexa 405；DyLight 594是綠色熒光，可完全替代FITC/Cy2/Alexa 488；完全替代Cy3/Rhodamin/Alexa 546/Alexa 555的Dylight 549；替代Texas Red/Alexa 594的Dylight 594；Dylight 633和Dylight 649(可替代Cy5/Alexa 647)則是更強(qiáng)的紅色熒光；另外，Dylight還有適配Odyssey系統(tǒng)的近紅外和遠(yuǎn)紅外二抗Dylight 680和DyLight 800。
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圖 1：HEp-2細(xì)胞使用ANA一抗(BIO-RAD)，并比較使用不同發(fā)色團(tuán)的二抗標(biāo)記。熒光顯微鏡下觀察ProLong Gold (Invitrogen)封片的細(xì)胞。Nikon LABOPHOTNikon 熒光顯微鏡連接D-70 DSLR 攝像機(jī)，100×曝光拍攝的圖片。圖中Alexa 594和DyLight 594標(biāo)記的細(xì)胞1秒曝光所拍，Texas Red標(biāo)記的細(xì)胞2秒曝光所拍。其它封片劑處理的細(xì)胞獲得類似的結(jié)果。 |
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圖2、以時間為橫坐標(biāo)，初始熒光強(qiáng)度的百分比為縱坐標(biāo)繪制的熒光強(qiáng)度圖表，HEp-2細(xì)胞以ANA(Bio-Rad)和各種紅色熒光標(biāo)記的山羊抗人IgG(H+L)的二抗標(biāo)記。細(xì)胞分別用ProLong Gold(左)、Vectashield(中)、含N-propyl gallate的 PBS-90%甘油封片(右)。由上圖所示，ProLong Gold 封片的細(xì)胞經(jīng)DyLight 594標(biāo)記顯色，耐光性強(qiáng)于Texas Red，與Alexa 594相當(dāng)。Vectashield封片的細(xì)胞用DyLight 594和Alexa 594標(biāo)記，耐光性弱于Texas Red。然而含N-propyl gallate的PBS-90%甘油封片的細(xì)胞DyLight 594標(biāo)記抗體，耐光性強(qiáng)于其他標(biāo)記抗體。 |
DyLight 594標(biāo)記的抗體熒光亮度明顯強(qiáng)于Alexa 594標(biāo)記抗體。相比較Texas Red而言，不僅更亮，而且具有更好的水溶性。與DyLight 549、Cy3或TRITC標(biāo)記物相比，它與綠色標(biāo)記染料表現(xiàn)出更大的色差；就其光學(xué)穩(wěn)定性，DyLight 594在不含有抗淬滅劑的條件下，遠(yuǎn)較Texas Red穩(wěn)定，與Alexa594相當(dāng)；在含有某些抗淬滅劑的情況下，DyLight 594同樣表現(xiàn)優(yōu)異。總之，在可見光譜的深紅色區(qū)域內(nèi)，DyLight 594標(biāo)記二抗是所有免疫熒光實驗中最好的選擇。另外，DyLight熒光標(biāo)記的二抗比傳統(tǒng)的FITC/Cy2以及Alexa 488具有更高的性價比。
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| 品名 | 品牌 | 貨號 | 規(guī)格 |
| DyLight 594 AffiniPure Goat Anti-Mouse IgG(H+L) | EarthOx | E032410 | 100μl/500μl |
| DyLight 594 AffiniPure Goat Anti-Rabbit IgG(H+L) | EarthOx | E032420 | 100μl/500μl |
| DyLight 594 AffiniPure Rabbit Anti-Goat IgG(H+L) | EarthOx | E032430 | 100μl/500μl |
| DyLight 594 AffiniPure Goat Anti-Rat IgG(H+L) | EarthOx | E032440 | 100μl/500μl |
Jackson 是全球?qū)I(yè)從事生產(chǎn)和銷售親和純化的二抗和純化免疫球蛋白的公司，其抗體產(chǎn)品線完全，有全球最大的二抗產(chǎn)品庫，能提供多種應(yīng)用類型和需要的二抗產(chǎn)品，其二抗產(chǎn)品本身也具有極高的產(chǎn)品質(zhì)量和穩(wěn)定性，其產(chǎn)品主要銷往到世界各地的大學(xué)科研所和醫(yī)院里的動物研究以及生物醫(yī)學(xué)研究機(jī)構(gòu)的科學(xué)家。