英文名：Proteinase K

蛋白酶KCAS NO:39450-01-6

外  觀：白色或類白色粉末

溶解性：可溶于水：1 mg/mL

酶  活：≥30 units/mg protein

蛋白酶K產(chǎn)品規(guī)格：25mg、100mg、500mg

用途及描述：科研試劑，廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)，藥理學(xué)等科研方面。一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關(guān)的絲氨酸蛋白酶，具有很高的比活性。EDTA等鰲合劑或SDS等去垢劑不能使蛋白酶K失活，反而增強(qiáng)和穩(wěn)定酶活性，并在較廣的PH范圍內(nèi)（PH4-12.5）均有活性。分離DNA和RNA期間使核苷酸酶蛋白失活；去除內(nèi)毒素對(duì)陽(yáng)離子蛋白的約束，如溶菌酶和核糖核酸酶；研究報(bào)告顯示用于分離肝，酵母，綠豆線粒體。測(cè)定細(xì)胞膜上的酶；用于抗體標(biāo)記，石蠟包埋組織切片中暴露抗原結(jié)合位點(diǎn)；消化腦組織樣本中的蛋白質(zhì)，用于朊病毒的傳染性海綿狀腦病（TSE）的研究

儲(chǔ)存條件：−20°C，避光防潮密閉干燥。

蛋白酶K的溶解性，蛋白酶K在水中的溶解性，蛋白酶K在生理鹽水中的溶解性，蛋白酶K在PBS緩沖液中的溶解性，蛋白酶K在DMSO、乙醇等有機(jī)溶劑中的溶解性，蛋白酶K在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)方面的應(yīng)用，蛋白酶K在大鼠等動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面的應(yīng)用

蛋白酶K的功能及使用方法：

蛋白酶K是一種切割活性較廣的絲氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵。此酶經(jīng)純化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中穩(wěn)定，還具有降解天然蛋白質(zhì)的能力，因而它應(yīng)用很廣泛，包括制備脈沖電泳的染色體DNA，蛋白質(zhì)印跡以及去除DNA和RNA制備中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作濃度是50-100μg/ml。在較廣的pH范圍內(nèi)(pH 4-12.5)均有活性。

 

推薦反應(yīng)緩沖液：50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。

 

蛋白酶k配制標(biāo)準(zhǔn)：20mg/ml蛋白酶K配制標(biāo)準(zhǔn)(proteinase K)：將200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，輕輕搖動(dòng)，直至蛋白酶K完全溶解。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。

 

蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反復(fù)凍融，有效保證12月。

 

孵育溫度為55至65℃，理想孵育溫度為58℃，孵育時(shí)間為15分鐘至48小時(shí);理想孵育時(shí)間為2小時(shí)。

 

應(yīng)用：蛋白酶K已廣泛應(yīng)用在皮革、毛皮、絲綢、醫(yī)藥、食品、釀造等方面。皮革工業(yè)的脫毛和軟化已大量利用蛋白酶，既節(jié)省時(shí)間，又改善勞動(dòng)衛(wèi)生條件。蛋白酶還可用于蠶絲脫膠、肉類嫩化、酒類澄清。臨床上可作藥用，如用胃蛋白酶治療消化不良，用酸性蛋白酶治療支氣管炎，用彈性蛋白酶治療脈管炎以及用胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶對(duì)外科化膿性創(chuàng)口的凈化及胸腔間漿膜粘連的治療。加酶洗衣粉是洗滌劑中的新產(chǎn)品，含堿性蛋白酶，能去除衣物上的血漬和蛋白污物，但使用時(shí)注意不要接觸皮膚，以免損傷皮膚表面的蛋白質(zhì)，引起皮疹、濕疹等過(guò)敏現(xiàn)象。

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